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超快速细胞冷冻捕获可观察分子组织

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荧鲜明微镜对布局或份子的解析结果取决于从布局中搜集的光量。在荧鲜明微镜中,可以耽误暴光时候以增添检测到的光量。但是,微不雅布局表示出随机和定向活动。耽误暴光时候会致使布局恍惚。

此刻,研究职员开辟了一种手艺,可以在任何感乐趣的时候点(几毫秒内)直接在荧鲜明微镜上不雅察活细胞中的份子动态,从而捕捉份子勾当模式。经由过程如许做,可以同时绕过活动恍惚和光粉碎的两个根基题目。

这项工作颁发在《科学进展》的文章中,“在显微镜上对活细胞进行超快速冷冻捕捉可以对非均衡份子模式进行多标准成像。”

经由过程极快地冷却至份子活动几近遏制的温度(-196°C)来完成禁止。因为两个缘由,拘系必需很是快。起首,若是拘系太慢,界说活细胞的通电微不雅模式就会分化成灭亡状况。其次,拘系的速度必需快于冰的构成进程,冰的构成会粉碎细胞。

在0°C至-136°C的临界规模内,结冰速度极快。但是,与直觉分歧的是,在很是低的温度(低于-136°C)下,冰晶没法构成,由于水份子的活动几近遏制了。这意味着冷却速度必需快于每秒100,000°C。

研究职员经由过程开辟一种与显微镜集成的超快速冷却装配,降服了这一手艺挑战,此中液氮(-196°C)的冷量在高压下加快到钻石上。统一颗钻石的另外一侧还固定着含有细胞的样品。高压爆裂与金刚石出色的导热性相连系,实现了需要的高冷却速度,使细胞在-196°C的温度下连结其原始设置装备摆设。这不但解决了活动恍惚的题目,还禁止了光化学粉碎。这开启了几近无穷暴光的可能性,凸起了在噪音中被袒护的份子图案。

超快速冷冻捕捉许可利用凡是具有粉碎性的高激光功率以数十纳米的分辩率阐发本来不成见的自然份子模式。因为在-196°C下不存在光粉碎,是以可以经由过程分歧的显微镜模式不雅察不异的捕捉细胞,以丈量从份子到细胞标准的模式。这项新手艺发现了癌卵白和肿瘤按捺卵白的纳米级共组织,可以庇护细胞免于表示出恶性行动。

“这是荧鲜明微镜的一个有益步调,出格是超分辩率显微镜和显微光谱学的连系,可以在多个标准上绘制细胞中的份子反映,”系统细胞生物学系传授兼主任PhilippeBastiaens博士

说,马克斯普朗克份子心理学研究所,位于德国多特蒙德。“它将改变我们不雅察细胞平分子组织和反映模式的体例,从而供给对生命物资自组织能力的更多看法。”

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